La costante di dissociazione (Kd) quantifica l'equilibrio tra un ligando (L) libero in soluzione e legato a un sito in una proteina (EL). Corrisponde all'affinità che il ligando ha per il sito di legame. I ligandi con energia libera di associazione più elevata e più favorevole si legano più "strettamente" e quindi hanno una maggiore preferenza per lo stato legato. Poiché Kd è definito come una costante di dissociazione, i ligandi ad affinità più elevata hanno valori di Kd più bassi.
Nell'inibizione competitiva, il substrato e l'inibitore non possono legarsi contemporaneamente all'enzima, questo di solito deriva dall'affinità dell'inibitore per il sito attivo di un enzima dove si lega anche il substrato; il substrato e l'inibitore competono per l'accesso al sito attivo dell'enzima. Questo tipo di inibizione può essere superata da concentrazioni sufficientemente elevate di substrato (Vmax rimane costante), cioè superando l'inibitore. Tuttavia, il Km apparente aumenterà in quanto occorre una maggiore concentrazione del substrato per raggiungere il punto Km, o metà del Vmax. Gli inibitori competitivi sono spesso simili nella struttura al substrato reale.