Die Dissoziationskonstante (Kd) quantifiziert das Gleichgewicht zwischen einem Liganden (L), der frei in Lösung ist und an eine Stelle in einem Protein (EL) gebunden ist. Sie entspricht der Affinität, die der Ligand zur Bindungsstelle hat. Liganden mit höherer, günstigerer freier Assoziationsenergie binden „fester“ und bevorzugen daher stärker den gebundenen Zustand. Da Kd als Dissoziationskonstante definiert ist, haben Liganden mit höherer Affinität niedrigere Kd-Werte.
Bei der kompetitiven Hemmung können Substrat und Inhibitor nicht gleichzeitig an das Enzym binden, dies resultiert normalerweise daraus, dass der Inhibitor eine Affinität zum aktiven Zentrum eines Enzyms hat, wo auch das Substrat bindet; Substrat und Inhibitor konkurrieren um den Zugang zum aktiven Zentrum des Enzyms. Diese Art der Hemmung kann durch ausreichend hohe Substratkonzentrationen (Vmax bleibt konstant) überwunden werden, dh indem der Inhibitor konkurriert wird. Der scheinbare Km nimmt jedoch zu, wenn eine höhere Konzentration des Substrats erforderlich ist, um den Km-Punkt oder die Hälfte von Vmax zu erreichen. Konkurrierende Inhibitoren haben oft eine ähnliche Struktur wie das reale Substrat.