Константа диссоциации (Kd) количественно определяет равновесие между лигандом (L), свободным в растворе, и связанным с сайтом в белке (EL). Это соответствует сродству лиганда к сайту связывания. Лиганды с более высокой и более благоприятной свободной энергией ассоциации связываются «крепче» и, следовательно, имеют большее предпочтение для связанного состояния. Поскольку Kd определяется как константа диссоциации, лиганды с более высоким сродством имеют более низкие значения Kd.
При конкурентном ингибировании субстрат и ингибитор не могут связываться с ферментом одновременно, это обычно происходит из-за того, что ингибитор имеет сродство к активному центру фермента, где субстрат также связывается; субстрат и ингибитор конкурируют за доступ к активному центру фермента. Этот тип ингибирования можно преодолеть с помощью достаточно высоких концентраций субстрата (Vmax остается постоянным), т. е. вытесняя ингибитор. Однако кажущийся Km будет увеличиваться, поскольку для достижения точки Km или половины Vmax требуется более высокая концентрация субстрата. Конкурентные ингибиторы часто похожи по структуре на реальный субстрат.